Імунохемілюмінесцентний аналіз, CLIA, є високочутливим методом імунологічного аналізу.
1. Принцип
Імунохемілюмінесцентний аналіз поєднує в собі специфічність імунної відповіді та високу чутливість хемілюмінесценції. Його основний принцип полягає в поєднанні специфічної імунної відповіді між антигеном і антитілом з реакцією хемілюмінесценції. Зокрема, антиген у досліджуваному зразку поєднується зі специфічним антитілом, утворюючи імунний комплекс. Потім через низку хімічних реакцій імунний комплекс виробляє хемілюмінесцентний сигнал. Інтенсивність люмінесценції пропорційна концентрації досліджуваного антигену, а вміст досліджуваного антигену можна кількісно проаналізувати шляхом визначення інтенсивності люмінесценції.
2. Основні компоненти
Антитіла: включаючи антитіла захоплення та антитіла виявлення. Захоплююче антитіло зазвичай фіксують на твердофазному носії для захоплення антигену, що підлягає тестуванню. Антитіло для виявлення поєднується з хемілюмінесцентним маркером для виявлення антигену в імунному комплексі.
Твердофазний носій: такий як мікропланшети, магнітні кульки тощо, який використовується для фіксації захопленого антитіла для полегшення імунної реакції, відділення та промивання.
Хемілюмінесцентний маркер: зазвичай речовина, яка може виробляти люмінесцентний сигнал у хімічній реакції, наприклад люмінол, ефір акридинію тощо. Маркер поєднується з антитілом для виявлення, щоб виробляти хемілюмінесцентний сигнал після імунної реакції.
Система виявлення: включає таке обладнання, як детектори люмінесценції, які використовуються для виявлення інтенсивності хемілюмінесцентних сигналів і перетворення їх у зчитувані значення.
3. Особливості
Висока чутливість: він може виявити надзвичайно низькі концентрації досліджуваної речовини, що зазвичай на кілька порядків чутливіше, ніж традиційні методи імунологічного аналізу.
Широкий лінійний діапазон: Вміст досліджуваної речовини можна точно виміряти в широкому діапазоні концентрацій без багаторазових розведень.
Сильна специфічність: ґрунтуючись на специфічному зв’язуванні антигену та антитіла, він має високу селективність щодо специфічних досліджуваних речовин.
Швидко: процес виявлення відносно швидкий, і результати зазвичай можна отримати за коротший час.
Високий ступінь автоматизації: він підходить для виявлення великомасштабних зразків і може використовуватися в поєднанні з автоматизованими приладами для підвищення ефективності виявлення.
4. Області застосування
Клінічна діагностика: використовується для виявлення різних біомаркерів, таких як онкомаркери, гормони, маркери інфекційних захворювань тощо, щоб забезпечити важливу основу для діагностики захворювання, моніторингу лікування та оцінки прогнозу.
Розробка ліків: використовується для моніторингу концентрації ліків, оцінки ефективності та дослідження метаболізму ліків.
Перевірка безпечності харчових продуктів: виявлення шкідливих речовин, залишків пестицидів, залишків ветеринарних препаратів тощо в продуктах харчування.
Екологічний моніторинг: Виявлення забруднюючих і токсичних речовин у навколишньому середовищі.